aCGT异体人脐带间充质干细胞静脉注射液治疗硬皮病aCGT Allogeneic Human Umbilical-cord Mesenchymal Stem Cell (hUC-MSC) Intravenous Injection forScleroderma

1.  作用机理 Mechanism of Action

硬皮病是以皮肤和组织器官纤维化、硬化为特征的自身免疫性结缔组织病，临床上主要分为两类：其中单纯只有皮肤受累而无明显内脏系统受累称为局限性硬皮病（Localized scleroderma, LS）和系统性硬化症（Systemic Sclerosis, SSc）

Scleroderma的标志性特征是胶原蛋白产生过多和细胞外基质过度沉积，但具体发病机制尚不完全清楚。目前普遍认为免疫功能障碍是Scleroderma形成的主要因素，但其他因素也被认为与发病有关[1,2]，包括遗传易感性、创伤、或环境因素以及血管功能障碍等。现有数据表明，局限性硬皮病的发病机理复杂[3]，其中血管、免疫系统和细胞外基质均受到影响，并且可能反过来促进该疾病的进一步发展。皮肤纤维化和皮下脂肪萎缩是局限性硬皮病的主要病理变化。在早期阶段，炎症反应是主要的病理过程，可导致血管受累，胶原蛋白增加。脂肪组织被新形成的胶原蛋白侵入并伴有炎性浸润。皮肤和皮下组织中的血管也被破坏。随着疾病的发展，纤维化过程在皮肤中发生，脂肪组织逐渐被取代。皮肤附属器减少，皮肤呈纤维化、皮下脂肪组织显著破坏，使患者面部出现不同程度的颜面畸形，包括面部萎缩和色素沉着[4,5]。

间充质干细胞治疗作用机理总结为以下几点：

Human Umbilical-cord Mesenchymal Stem Cell (hUC-MSC)是从脐带组织中分离得到的一种具有多向分化潜能的间充质干细胞。研究表明，脐带干细胞具备间充质干细胞的基本属性，具有向脂肪、骨、软骨等多个组织方向分化的潜能，可用作组织修复的干细胞来源。其次，脐带间充质干细胞具有免疫调节功能，能够抑制炎症反应，降低转化生长因子-β（TGF-β）、I型胶原蛋白（Collagen I）的表达，抑制成纤维细胞增生。同时，脂肪干细胞能够分泌多种细胞因子，如血管内皮生长因子（VEGF），具有促进新生血管生成的功能。

另一方面，脐带间充质干细胞来源广泛易得，可以充分满足临床治疗需要。脐带间充质干细胞的这些特质使得其成为一种极具潜力的治疗硬皮病的新型药物。

参考文献：

[1] Kaushik A, Mahajan R, De D, Handa S. Paediatric morphoea: a holistic review. Part 1: epidemiology, aetiopathogenesis and clinical classification. Clin Exp Dermatol 2020; 45(6): 673-8.

[2] Saracino AM, Kelberman D, Otto GW, Gagunashvili A, Abraham DJ, Denton CP. Unravelling morphoea aetiopathogenesis by next-generation sequencing of paired skin biopsies. Arch Dermatol Res 2023.

[3] Papara C, De Luca DA, Bieber K, Vorobyev A, Ludwig RJ. Morphea: The 2023 update. Front Med (Lausanne) 2023; 10: 1108623.

[4] Chiu YE, Shmuylovich L, Kiguradze T, et al. Body site distribution of pediatric-onset morphea and association with extracutaneous manifestations. J Am Acad Dermatol 2021; 85(1): 38-45.

[5] Strong AL, Rubin JP, Kozlow JH, Cederna PS. Fat Grafting for the Treatment of Scleroderma. Plast Reconstr Surg 2019; 144(6): 1498-507.

2. 未满足临床需求 Unmet Clinical Needs

（1）流行病学:

硬皮病是一种罕见的疾病，以弥漫性皮肤的纤维化为特点，最后发展为皮肤和结缔组织的硬化及萎缩[1,2]，从而造成患者的色素沉着、斑状脱发、畸形等，严重影响患者的日常生活和患者尊严及自信。硬皮病发病率为每年0.4-2.7人/十万人[3,4]，多发于女性（男:女约为1:3）[5]，好发年龄在2-14岁[6,7]，在我国局限性硬皮病每年新增病例25,000人左右。

（2）目前治疗手段:

硬皮病的治疗目前尚无特效疗法，也没特定的治疗指南，局限性硬皮病的早期治疗主要针对免疫、血管及胶原的异常，以抗炎、免疫抑制、免疫调节、改善血循环和减少纤维化为基础[6]。后期遗留皮肤硬化、皮下脂肪萎缩、局部凹陷等畸形，常常需要整形科配合治疗[7]。局部凹陷畸形的整形外科治疗目前包括带血管蒂的自体组织移植及不带血管蒂的自体组织移植。带血管蒂的组织移植手术创伤大，显微缝合风险高等，自体脂肪移植因手术创伤小，成为最受患者及整形科医师欢迎的治疗方案[8]。但自体脂肪移植的部位局部血供差，免疫因素等影响，脂肪的存活率一般较其他情况的脂肪移植效果差。因此，开发一种新的治疗方法对于改善LS患者皮肤硬化程度、张口度、面部畸形等，提高生活质量至关重要。

本产品的治疗优势：

现有的长期随访研究为UC-MSC的安全性提供了关键证据。一项针对41例中重度硬皮病患者的5年随访研究显示，UC-MSC移植后的5年总生存率高达92.7%，且在随访期间未观察到与治疗相关的严重不良事件。这为UC-MSC作为难治性硬皮病的一种可行治疗选择奠定了基础。

持续改善皮肤硬化：皮肤硬化是硬皮病的主要表现之一，改良Rodnan皮肤评分（mRSS）是评估其严重程度的金标准。上述5年随访研究显示，患者的平均mRSS从基线时的18.68分，在治疗后1年、3年和5年分别显著降至13.95、13.29和12.39分。这表明UC-MSC治疗带来的皮肤改善效果是持续且长期的。

稳定内脏器官病变：硬皮病常累及肺部等内脏器官，预后较差。研究观察到，在接受UC-MSC治疗后，72.0%的间质性肺病（ILD）患者的高分辨率CT（HRCT）影像显示改善或保持稳定。同时，在8名伴有肺动脉高压（PAH）的患者中，有5名在5年随访期内病情保持稳定。这提示UC-MSC可能对延缓或稳定肺部病变的进展有益。

作用机制的优势：UC-MSC的治疗潜力源于其独特的生物学特性。作为一种多能细胞，UC-MSC具有免疫调节、促血管生成和抗纤维化的特性，这些特性恰好针对硬皮病发病机制的三个核心环节。

关键文献：

[1] Papara C, De Luca DA, Bieber K, Vorobyev A, Ludwig RJ. Morphea: The 2023 update. Front Med (Lausanne) 2023; 10: 1108623.

[2] Chiu YE, Shmuylovich L, Kiguradze T, et al. Body site distribution of pediatric-onset morphea and association with extracutaneous manifestations. J Am Acad Dermatol 2021; 85(1): 38-45.

[3] Snarskaya ES, Vasileva KD. Localized scleroderma: actual insights and new biomarkers. Int J Dermatol 2022; 61(6): 667-74.

[4] Knobler R, Moinzadeh P, Hunzelmann N, et al. European Dermatology Forum S1-guideline on the diagnosis and treatment of sclerosing diseases of the skin, Part 1: localized scleroderma, systemic sclerosis and overlap syndromes. J Eur Acad Dermatol Venereol

2017; 31(9): 1401-24.

Kaushik A, Mahajan R, De D, Handa S. Paediatric morphoea: a holistic review. Part 1: epidemiology, aetiopathogenesis and clinical classification. Clin Exp Dermatol 2020; 45(6): 673-8.

[6]Abduelmula A, Rankin BD, Riaz S, Ross N, Luca NJ, Prajapati VH. Management of morphea with systemic immunosuppressive therapies: An evidence-based review. J Am Acad Dermatol 2023; 88(2): 467-9.

[7]Zhao M, Wu J, Wu H, Sawalha AH, Lu Q. Clinical Treatment Options in Scleroderma: Recommendations and Comprehensive Review. Clin Rev Allergy Immunol 2022; 62(2): 273-91.

[8]Weibel L. Diagnosis and management of morphoea in children: an overview. Clin Exp Dermatol 2021; 46(3): 487-94.

3. 全球同产品对比情况 Comparison of Similar Products Worldwide

根据文献检索和临床试验注册库的信息，利用间充质干细胞治疗硬皮病已成为研究热点之一。Clinical Trials多项注册或在研的临床试验揭示了该领域的活跃态势。以下是关键的代表性注册研究：

NCT06722105 (MSC-AT-SSc)：一项由法国公共援助局-巴黎医院发起的I/II期随机临床试验。该研究计划纳入18例重度SSc患者，旨在评估同种异体脂肪来源间充质干细胞（MSC(AT)）重复静脉输注的安全性和疗效，接受1-3×10⁶/kg BM-MSCs输注，无严重相关不良事件；15名达到临床应答（15/19，78.9%）；在应答者中，输注后早期，循环中的CD24⁺CD27⁺CD38⁺记忆B细胞（主要的IL-10产生调节性B细胞亚群）比例增加；无应答者在治疗前，其分选的B细胞中促纤维化细胞因子IL6和TGFβ的表达水平更高；输注后1个月，应答者B细胞中IL10基因表达显著上调[1][2]。

[1] Regulatory B Cells Contribute to the Clinical Response After Bone Marrow-Derived Mesenchymal Stromal Cell Infusion in Patients With Systemic Sclerosis. Stem Cells Transl Med. 2023 Apr 17;12(4):194-206. doi: 10.1093/stcltm/szad010.

[2] Safety and preliminary efficacy of allogeneic bone marrow-derived multipotent mesenchymal stromal cells for systemic sclerosis: a single-centre, open-label, dose-escalation, proof-of-concept, phase 1/2 study. Lancet Rheumatol. 2022 Feb;4(2):e91-e104. doi: 10.1016/S2665-9913(21)00326-X.

4. aCGT药学CMC研发 aCGT Pharmaceutical CMC R&D

aCGT细胞库：已完成细胞库(种子库、主库、工作库)建立的工艺开发、细胞库质量分析方法的开发和验证，形成了细胞库的质量标准，并建立多个符合质量标准且可用于人脐带间充质干细胞注射液中试生产的细胞库。同时，持续进行细胞库运输稳定性、存储稳定性等研究，目前存储稳定性研究已开展至60个月，显示稳定性良好。

aCGT中试生产：已完成人脐带间充质干细胞注射液中试生产的工艺开发、分析方法开发和验证，形成了以“淋巴细胞增殖抑制检测、淋巴细胞分泌TNF-α抑制、淋巴细胞分泌IL-17A抑制和IDO1活性检测”等生物学功能检测为代表的注射液质量标准；完成多批次注射液中试生产，代表批次由中国食品药品检定研究院出具质量符合合格证书。同时，中试生产批次用于运输稳定性、使用稳定性及存储稳定性等持续性研究中，目前存储稳定性研究已开展至48个月，显示稳定性良好。

aCGT临床试验IND申报：上述扎实的药学CMC研究，已支持aCGT人脐带间充质干细胞注射液用于治疗呼吸窘迫综合征（ARDS）、强直性脊柱炎（AS）、烧伤、失代偿期乙肝病毒肝硬化和慢性阻塞性肺疾病等适应证的临床试验申报，并均获得中国药监局临床默示许可IND。其中，aCGT人脐带间充质干细胞注射液治疗强直性脊柱炎（AS）以获得美国FDA的pre-IND meeting积极性回复函。

aCGT人脐带间充质干细胞注射液用于治疗更多适应症预计于2026-2027年申请获批IND。

同时，aCGT目前正在进行封闭式的全自动反应器体系工艺的开发和优化，有望在保证细胞质量的前提下，实现更低成本更大产量的工艺升级。

5. 非临床研究 Non-clinical R&D

aCGT按照治疗用生物制品1类新药申报要求完成了药代动力学和毒理学评价研究，药效学研究也即将开展。

aCGT委托具专业资质的CRO公司上海益诺思生物技术股份有限公司完成了非临床安全评价动物实验。相关实验报告另见。

aCGT委托具专业资质的CRO公司四川格林泰科生物科技有限公司完成了非临床药效动物实验。相关实验报告另见。

药理学部分:

小鼠硬皮症模型药效学结果显示，与模型对照组相比，aStem-M®人脐带间充质干细胞注射液对博来霉素Balb/c小鼠硬皮症模型具有很好的治疗效果，通过调节体内免疫功能，对动物皮肤血流的微循环障碍具备显著的改善作用（P≤0.01），且低、高剂量组具有很好的量效曲线关系。

次要药效学结果显示：aCGT人脐带间充质干细胞注射液

对PHA激活的PBMC增殖有显著的抑制作用（p≤0.05）；

对PHA激活的PBMC分泌TNF-α、IL-17A有显著抑制作用；

对PHA激活的PBMC分泌IL-6有显著促进作用（p≤0.05）。

对PHA激活的PBMC中T细胞亚群Th1和Th17细胞的活化和增殖有显著抑制效果（p≤0.05）；

对PBMC中Treg细胞的活化和增殖有显著促进效果（p≤0.05）；

对PHA激活的PBMC增殖有显著的抑制作用（p≤0.05）。

安全药理学结果显示，aCGT人脐带间充质干细胞注射液对动物中枢神经系统、血管系统和呼吸系统无明显影响。

药代动力学部分:

体内分别实验结果显示，静脉注射本品aCGT人脐带间充质干细胞注射液后，其干细胞主要分布于肺部和肝脏。

毒理学部分:

毒性实验结果显示，aCGT人脐带间充质干细胞最大安全剂量为10×107 cells /kg。体内外成瘤性和致瘤性实验结果表明，aCGT人脐带干细胞注射液无致癌性风险。

6. 生产能力 Production Capacity

aCGT目前委托生产的设施包括：①位于上海的CRO泉生公司自有约1000平米C级洁净和约1500平米B级洁净细胞制剂制备车间和质控实验室；②正在装修建设中的、位于中国浙江安吉的、CRO泉生公司自有的近30000平米含各洁净级别和设施的细胞制剂制备车间和质控实验室；③Contracted香港HKIB的PIC/S GMP标准车间。

同时，满足生产工艺要求的配套仪器设备均已完成设备验证等工作。

本产品aCGT人脐带间充质干细胞注射液生产周期约15天。目前年产量可达2400~3600亿细胞，可供2400~3600人次使用。aCGT正在开发中的封闭式的全自动反应器体系工艺，有望达到单批次“千亿级细胞”的规模产量，实现更低成本更高产量的同时，年产量达到30000亿产量，满足万人次的使用。

7.  临床试验数据 Clinical Data

暂无

中美欧药监局双申报计划Plan for China NMPA, US FDA & European EMA Filings

本产品计划于2026年9月向中国NMPA申请临床试验。

9. 专利情况 Patent Information

人脐带间充质干细胞作为自人类存在以来就已存在的与生俱来的原代细胞，本身无专利保护。同时，人脐带间充质干细胞的分离、纯化、生产、质控等基本过程作为长期公开知识也无专利保护。为提高生产效率或质量或疗效等的各公司特有处理技术步骤和方法，各公司可能拥有其专利或保密措施。

目前，aCGT已申请获得“一种适用于脐带间充质干细胞制剂的冻存方法”等授权发明专利3项；“一种冻存袋用冻存架”等授权实用新型专利7项；“一种多层培养瓶结合的细胞培养方法”等公布状态的发明专利12项。同时，aCGT正在申请的“对建立主细胞库的源组织筛选技术和方法”专利等10余项。

专利研究表明，aCGT的“异体人脐带间充质干细胞静脉注射液及其临床应用”不存在潜在知识产权纠纷。